【摘要】目的：探討主動免疫療法對原因不明復發(fā)性流產(chǎn)(URSA)患者外周血CD56+CD16+NK細胞及CD4+CD25+Treg細胞表達的影響。方法：應用流式細胞儀檢測50例URSA患者經(jīng)主動前后外周血CD56+CD16+NK細胞及CD4+CD25+Treg細胞，并與正常育齡婦女作對照。結(jié)果：與對照組比較，URSA組CD56+CD16+NK細胞比例上升而CD4+CD25+Treg的表達下降(P<0.05)。經(jīng)淋巴細胞主動免疫療法的患者，治療后CD56+CD16+NK細胞數(shù)量較治療前降低(P<0.05);CD4+CD25+Treg的表達較治療前增高(P<0.05)，差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)論：URSA的發(fā)生與CD4+CD25+Treg的表達下降及具有殺傷活性的CD56+CD16+NK細胞數(shù)量上升有關(guān)，主動免疫療法可以降低CD56+CD16+NK細胞數(shù)量，上調(diào)CD4+CD25+Treg的表達，從而有利于胚胎發(fā)育。

【關(guān)鍵詞】復發(fā)性流產(chǎn) 淋巴細胞免疫療法 自然殺傷細胞

資料與方法

2008年10月～2009年8月原因不明復發(fā)性流產(chǎn)(URSA)患者50例作為治療組，年齡22～44歲，平均29.67±4.1歲。正常對照組：同期正常非妊娠婦女27例，年齡23～39歲，平均28.91±2.02歲。

方法：主動免疫療法方法。抽取健康配偶或第三者外周血50ml，分離淋巴細胞，用生理鹽水充分洗滌3次，調(diào)至細胞濃度(2～7)×107/ml,分別在患者前臂注射3～5mm的皮丘各3個。每4周1次，3次為1個療程。

統(tǒng)計學處理：組間的比較用q檢驗。

結(jié)果

URSA組治療前CD56+CD16+NK細胞表達為(22.68±6.21)%，較正常對照組(13.24±3.51)%高，差異有統(tǒng)計學意義(q=2.96，P<0.05)。URSA組治療后CD56+CD16+NK細胞表達為(15.07±4.54)%，較治療前下降，差異有統(tǒng)計學意義(q=3.45，P<0.05);治療后CD4+CD25+Treg細胞表達為(11.40±5.57)%，較治療前上升，差異有統(tǒng)計學意義(q=2.77，P<0.01)。

討論

復發(fā)性流產(chǎn)是指連續(xù)≥2次自然流產(chǎn)，發(fā)生率1%～5%[1]。除已知的遺傳、解剖、感染、內(nèi)分泌等原因外，仍有50%～70%原因不明，稱為原因不明復發(fā)性流產(chǎn)(URSA)，其中50%～60%與免疫有關(guān)^②。多項研究表明，復發(fā)性流產(chǎn)患者由于NK細胞毒性明顯增高，而調(diào)節(jié)T細胞(CD4+CD25+Treg)表達下降，導致對胚胎的免疫殺傷，從而引起流產(chǎn)。

NK細胞為非特異性免疫活性細胞，其細胞表面標志為CD56分子。NK細胞的殺傷活性無MHC限制，通過其直接與靶細胞接觸后釋放穿孔素、顆粒酶等細胞因子，誘導靶細胞程序性死亡。NK細胞分兩類，一類為CD56+CD16-(90%)另一類為CD56+CD16+(10%)。CD56+CD16-NK細胞有免疫抑制作用和免疫營養(yǎng)作用。可經(jīng)IL-2刺激轉(zhuǎn)化為CD56+CD16+NK細胞，細胞毒性增強，發(fā)揮免疫防御功能^③。研究證實CD4+CD25+T細胞在妊娠期參與抑制母體對同種異體移植物胎兒的免疫反應，從而保證妊娠的成功。

本研究表明：復發(fā)性流產(chǎn)患者接受主動免疫療法后CD4+CD25+Treg的比例明顯上調(diào)，CD56+CD16+NK細胞的表達下降。由此推測應用淋巴細胞主動免疫療法復發(fā)性流產(chǎn)的患者可能是通過外來抗原激活母體調(diào)節(jié)性T細胞，以及通過NK細胞功能狀態(tài)調(diào)節(jié)的來誘導母體對胚胎的免疫耐受，保護胚胎免受母體的排斥，從而妊娠得以成功。而且檢測CD4+CD25+Treg細胞、CD56+CD16+NK細胞可作為免疫療法療效觀察的有效指標。

【參考文獻】

1、StephensonMD.Frequencyoffactorsassociatedwithhabitualabortionin197couples.FertilSteril,1996,66:24-29.

2、林其德.免疫所致復發(fā)性流產(chǎn)和習慣性流產(chǎn).中華婦產(chǎn)科雜志,2000,35(12):760.

3、MatsubayashiH,ShidaM,KondoA,etal.Preconceptionperipheralnaturalkillercellactivityasapredictorofpregnancyoutcomeinpatientswithunexplainedinfertility.AmJReprodImmunol,2005,53(3):126-131.